В то время, православные люди Галиции и Волыни терпели всевозможные притеснения со стороны польско-литовской знати, исповедовавших католическую веру. К 1596 году, протестантство и католицизм практически вытеснили православие с этих земель. С согласия своего наставника, Иов вскоре возглавил Дубенский монастырь, и его братию последующие 20 лет. Преподобный активно занялся распространением православия среди местных прихожан. Для этой цели, он переводил и переписывал книги на славянский язык и раздавал прихожанам. Иов стал духовным наставником не только простых людей, но и вельмож. Один из них, князь Константин, пользуясь особым расположением польского короля Сигизмунда Третьего, часто защищал преподобного от нападок католиков и униатов.
И все же, преподобный Иов тяготел не к служению просвещения, а к монашеским подвигам. Книгопечатание отнимало практически все свободное время, а ему так хотелось предаться молитвенным трудам и вести уединённый образ жизни. Для этого, Иов удаляется в обитель на гору Почаевскую, где еще во времена нашествия Батыя, спасались монахи Киево – Печерского монастыря. Иов добился того, что эта обитель, со временем, стала первой среди западнорусских обителей, и прославил ее. Среди тех, кто приходил к Иову за духовным наставлением, были не только простые люди, но и помещики, и люди знатного рода. Они приносили щедрые пожертвования монастырю. Иов же, на эти деньги построил храм во имя Пресвятой Троицы, там хранилась Почаевская икона Богоматери и, даже, отпечаток ее ступни, обретенный в 1340 году, после ее чудесного явления в огненном столпе.
Подвиг преподобного Иова состоял не только в просвещении народа и обращении многих людей в православную веру, но и в его подвижнических трудах. При нем, в Почаевской обители, была организована типография, где было напечатано много православных книг и молитвословов. Очевидцы не раз замечали чудесный свет, исходивший из пещеры преподобного во время его молитв. Скончался святой в возрасте 98 лет, 10 ноября 1651 года, и был похоронен возле своей пещеры.
Когда прошло 7 лет со дня смерти преподобного, он приснился митрополиту Дионисию. Во сне, преподобный попросил вскрыть его мощи, что и было сделано 28 августа 1659 года. Мощи переместили в храм Живоначальной Троицы. Очевидцы рассказывали, что в тот день произошло много чудесных исцелений. Даже смертельно больные люди, внезапно выздоровели. Даже, когда в 18 веке, униты завладели Почаевским монастырем, они были потрясены чудесными исцелениями, происходившими у гроба преподобного Иова. Униты стали почитать почаевского чудотворца как святого, и даже обратились к Папе Римскому с просьбой, канонизировать Иова. Тот отказал, ввиду того, что святой слишком рьяно способствовал делу распространения православия, а не католичества.
10 ноября, Русская Православная Церковь отмечает праздник, в честь преподобного Иова, игумена Почаевского, помня о его просветительской деятельности, его заслугах в области распространения православия, а так же о его сподвижничестве и многим чудесам исцеления.